При исследовании действия препаратов на выработку УРПМ фенамина введение SB-408124 (1мкг, в/ж) снижало время нахождения в отсеке с введением препаратов, относительно показателей действия отдельно фенамина (1мг/кг, в/б) с 424,6с до 315с, а число переходов из отсека в отсек увеличилось с 7 до 11. При введении SB-408124 (10мкг, в/ж) совместно с фенамином (1мг/кг, в/б) время нахождения в отсеке с введением препаратов, относительно показателей фенамина (1мг/кг, в/б), снижалось с 424,6с до 318с, а число переходов из отсека в отсек увеличилось с 7 до 8. В опытах на экспрессию УРПМ фенамина (1мг/кг, в/б) при введении SB-408124 (1мкг, в/ж) время нахождения в отсеке с введением препаратов, относительно показателей фенамина, снижалось с 424,6с до 329с, а число переходов из отсека в отсек увеличилось с 7 до 11. При введении SB-408124 (10мкг, в/ж) время нахождения в отсеке с введением препаратов, относительно показателей отдельно фенамина (1мг/кг, в/б), снижалось с 424,6с до 336с, а число переходов из отсека в отсек увеличилось с 7 до 11.В опытах влияния препаратов на выработку предпочтения места при введении Orexin B18-28 (1мкг, в/ж) совместно с фенамином (1мг/кг, в/б) время нахождения в отсеке с введением препаратов, относительно показателей фенамина (1мг/кг, в/б), снижалось с 424,6с до 331с, а число переходов из отсека в отсек увеличилось так же с 7 до 11. При введении Orexin B18-28 (10мкг, в/ж) совместно с фенамином (1мг/кг, в/б) время нахождения в отсеке с введением препаратов, относительно показателей фенамина (1мг/кг, в/б), снижалось с 424,6с до 324с, а число переходов из отсека в отсек увеличилось так же с 7 до 13. В опытах на экспрессию УРПМ фенамина при введении Orexin B18-28 (1мкг, в/ж) время нахождения в отсеке с введением препаратов, относительно показателей отдельно фенамина (1мг/кг, в/б), снижалось с 424,6с до 382с, а число переходов из отсека в отсек увеличилось так же с 7 до 10 .При введении Orexin B18-28 (10мкг, в/ж) время нахождения в отсеке с введением препаратов, относительно показателей отдельно фенамина (1мг/кг, в/б), снижалось с 424,6с до 358с, а число переходов из отсека в отсек не изменялось. При использовании антагонистов орексина в дозе 0,1мкг, на выработку предпочтения места и экспрессию УРПМ фенамина в/ж оба антагониста достоверно не влияли на эффекты фенамина.
Таким образом, антагонисты орексина достоверно снижают как выработку, так и экпрессию УРПМ фенамина, особенно эти эффекты проявляются при использовании 10 мкг, в/ж. При использовании антагонистов орексина в дозе 0,1мкг, как на реакцию самостимуляции, активируемую фенамином, так и на выработку и экспрессию УРПМ фенамина, антагонисты рецепторов орексина не влияли на подкрепляющие эффекты фенамина.
Это согласуется с рядом литературных данных, подтверждающих участие рецепторов орексина в подкрепляющем действии психостимуляторов. В серии работ, выполненных под руководством П.Д. Шабанова, получены данные о вовлечении рецепторов нейропептида головного мозга орексина, как ключевого внутримозгового звена формирования и поддержания зависимости от психоактивных средств, а также реализации механизмов срыва (Шабанов П.Д., Лебедев А.А., 2012; Шумилов Е.Г.и др., 2014). При использовании внутримозгового введения веществ в структуры расширенной миндалины (extended amygdala), центральное ядро миндалины, ядро ложа конечной полоски и медиальный отдел прилежащего ядра, показано тормозное действие антагониста рецепторов орексина SB-408124 на реакцию самостимуляции латерального гипоталамуса, активируемой фенамином. Известно, что система расширенной миндалины помимо рецепторов орексина содержит большое количество рецепторов кортиколиберина (CRF). Она рассматривается как основа экстрагипоталамической системы CRF, влияя на стресс-зависимое поведение, инициируя эмоционально-мотивированные ответы и опосредуя его анксиогенные эффекты (Koob G. F., 2009). Структурам расширенной миндалины принадлежит координирующая роль в формировании эмоциональных, обусловленных стрессом реакций, ведущую роль в запуске которых играют нейромедиаторы дофамин и глутамат, а также ряд нейроактивных пептидов (CRF, орексины, грелин, нейрокинины и др.) (Лебедев А.А. и др., 2011, Шабанов П.Д., Лебедев А.А., 2012; Шабанов П. Д. и др., 2014; GotterA. L. etal.,2012; HutchesonD. M.etal.,2011).
Деятельность дофаминергической системы, как нейрохимической основы механизмов подкрепления, модулируется множеством факторов, в том числе пептидной природы (Шабанов П. Д. и др., 2014). Одним из наиболее перспективных направлений психофармакологии является поиск антиаддиктивных средств среди нейропептидов. Несмотря на сравнительно непродолжительное существование в организме большинства пептидов, они, как правило, способны вызывать долговременные перестройки реактивности рецепторного аппарата синаптических мембран. С этим можно отчасти связать их фармакологический эффект, не только непосредственный, но и отсроченный (Сапронов Н.С., 2005). К числу перспективных нейропептидов, существующих в организме и оказывающих мощное фармакологическое действие при экзогенном введении, можно отнести орексины (Шумилов Е.Г. и др., 2014)
Исследованиями последних лет доказана высокая плотность OX1R в структурах расширенной миндалины (GotterA.L. et al., 2012). В настоящее время стало очевидным, что нейропептиды гипоталамуса орексины (наряду с другими нейропептидами) участвуют в механизмах подкрепления и пищевого поведения. Показано также участие орексинов в механизмах пробуждения (arousal) и поддержания уровня бодрствования (Boutrel B., DeLecea L., 2008). В настоящей работе продемонстрировано блокирующее действие антагониста OX1R SB-408124 и антагониста Orexin B18-28 при внутрижелудочковом введении на вызванную фенамином активацию самостимуляции латерального гипоталамуса. При этом SB-408124, так и Orexin B18-28 существенно не меняли спонтанную самостимуляцию латерального гипоталамуса при введении в боковой желудочек. Полученные данные согласуется с рядом исследований действия орексина и его антагонистов на подкрепляющие свойства психостимуляторов. В частности, показано, что центральные введения орексина вызывают ряд эффектов при использовании экспериментальных моделей аддиктивного поведения (Mahler S.V. et al., 2012). Так, орексин принимает участие в развитии локомоторной сенситизации и экспрессии условной реакции предпочтения места кокаина. Орексин также вызывает активацию реакции самовведения кокаина, если она наблюдается на фоне высокой мотивации (например, голода) или вовлекает стрессорные стимулы среды. Напротив, орексин не действует на реакцию самовведения кокаина в отсутствии этих стимулов. Сделан вывод, что орексин может специфично инициировать тягу к психостимуляторам, но не влиять на их способность вызывать положительные подкрепляющие эффекты (Mahler S.V., 2012).
Последнее согласуется с рядом исследований по изучению действия антагонистов рецепторов орексина на подкрепляющие свойства психостимуляторов на моделях самостимуляции и самовведения. В частности, было показано, что орексин может быть вовлечён в поиск подкрепляющего агента под воздействием стимулов окружающей среды, связанных со стрессом (Espana R. A. et al.,2010). Системное введение антагониста OX1RSB-334867 блокировало восстановление реакции самостимуляции мозга после процедуры наказания электростимуляцией по лапам у животного, при этом внутрижелудочковое введение орексина увеличивало порог самостимуляции мозга (Boutrel B., De Lecea L., 2008). В этих условиях, в противоположность антагонисту OX1RSB-334867, внутрижелудочковое введение орексина восстанавливало тягу к кокаину, а системное введение антагонистов CRF или норадреналина блокировало этот эффект (Boutrel B., De Lecea L., 2008). По-видимому, внутримозговой мишенью действия этих стресс-подобных эффектов не является вентральная область покрышки, дающая начало мезолимбической дофаминергической системе, поскольку восстановление тяги к кокаину после введения орексина в данную структуру не блокировалось введением антагониста CRF (Wang B. et al., 2009).
