Впервые метод декапсулирования был использован японскими учеными в 1962 г. при проведении биохимического анализа яиц. Начиная с 1977 г. в зарубежной литературе стало появляться большое количество работ, посвященных усовершенствованию метода декапсулирования яиц артемии и практическому применению их в аквакультуре (рыбоводные и креветочные питомники).

Многое в этой области сделано бельгийскими учеными, которые пропагандировали данный метод в своих статьях на различных конференциях и в школах-семинарах, заключали контракты по линии ФАО на внедрение его в странах с развивающейся аквакультурой, например, в Индонезии, Таиланде, на Филиппинах и в Бразилии. В настоящее время этот метод освоен практически во всех тех странах, где развивается аквакультура.

В нашей стране метод декапсулирования также начинает находить свое применение, в частности для подращивания личинок карпа и растительноядных рыб. В этом направлении проводят работы П. Воронов и В. Никитчук в Ростовской области, М. Яковчук в Краснодарском крае, Е. Гусев в Московской области.

Какие же преимущества дает применение метода декапсулирования яиц артемии? Прежде всего упрощается техника инкубации яиц, так как не требуется отделять науплиев от оболочек, которые растворяются при обработке. При этом уменьшается потеря яиц, сокращается ручной труд. Рыбоводы знают, какие трудности представляет процесс отделения науплиев от скорлупы и особенно от яиц, выклев из которых не состоялся. Скорлупа и невыклюнувшиеся яйца при попадании в выростные емкости с личинками рыб заглатываются ими, но не перевариваются и, заполняя кишечник, иногда вызывают массовую гибель.

Многие объекты аквакультуры (например, креветки, крабы, некоторые растительноядные рыбы, карпы) могут использовать продекапсулированные эмбрионы непосредственно в пищу, что дает возможность обойтись вообще без инкубации, а это значительно сокращает затраты на оборудование.

По сравнению с проинкубированными обычным способом эмбрионами продекапсулированные имеют несколько больший вес и более высокое содержание энергии, так как она не расходуется на разрыв хориона при выклеве. Например, калорийность продекапсулированных эмбрионов аргентинского штамма по сравнению с калорийностью необработанных повышалась на 10 %. Для некоторых штаммов артемии декапсулирование приводит к увеличению эффективности выклева науплиев. Так, для колумбийского штамма выклев после обработки яиц по сравнению с выклевом из необработанных яиц увеличивался на 60 %.

Декапсулированные эмбрионы при инкубации дают дружный выклев, а это значит, что появившиеся науплии могут находиться на одной стадии развития. Появляется возможность использования науплиев на стадии Е 1, в то время как на стадии Е 2, наступающей через несколько часов, их калорийность становится на 25 % ниже. Таким образом, одновременный выклев яиц дает значительную экономию.

Освобожденные от хориона эмбрионы практически стерильны, так как в процессе обработки находящиеся на оболочках бактерии, споры грибов и водорослей погибают.

За рубежом, в частности в США, появились фирмы, производящие сухие декапсулированные эмбрионы. При их инкубации из 1 г удается получить от 175 до 500 тыс. науплиев (в зависимости от сорта). Цена такого продукта составляет 45–70 долларов за 1 кг.

Итак, полученные после декапсулирования эмбрионы можно использовать для трех целей. Во-первых, их можно проинкубировать и полученные науплии использовать традиционным путем. Во-вторых, некоторые виды рыб и беспозвоночных могут употреблять их непосредственно. В-третьих, их можно «законсервировать» в насыщенном солевом растворе и хранить в течение нескольких месяцев, а по мере надобности проинкубировать или использовать в корм. В насыщенном солевом растворе происходит обезвоживание эмбрионов, и процессы жизнедеятельности у них приостанавливаются. Чтобы продолжить развитие эмбриона, его надо обводнить — поместить в воду с соленостью ниже 85 %.

Личинки морских рыб, обладающие ярко выраженным охотничьим инстинктом, не могут употреблять в пищу неподвижные частицы. Поэтому при разведении кефалей, камбаловых, серрановых и других видов морских рыб продекапсулированные эмбрионы обязательно должны быть проинкубированы, но декапсуляцию надо провести таким образом, чтобы жизнеспособность их сохранилась и эффективность выклева не снизилась. В данном случае нужно особо внимательно подходить к выбору декапсулирующего реагента и времени обработки.

Для декапсулирования яиц артемии используются различные реактивы: в странах Западной Европы широко распространен гипохлорит натрия, в странах Восточной Европы и Юго-Восточной Азии предпочитают гипохлорит кальция, так как там он более дешев и широко применяется для дезинфекции бассейнов, ванн и т, д.

Наша промышленность выпускает гипохлориты натрия и кальция, причем в последнем может содержаться различное количество активного хлора, в зависимости от марки. Меньше всего его содержится в хлорной извести — 36 %, в лучших марках — до 80 %. Поскольку в декапсулирующем растворе должно содержаться 2–4 % активного хлора, его можно приготовить из реактивов различных марок, но в каждом отдельном случае концентрацию активного хлора требуется предварительно определить путем титрования гипосульфитом (см. Методы гидрохимических исследований океана, «Наука», АЛ., 1978).

Согласно данным бельгийских исследователей, концентрация активного хлора в декапсулирующем растворе должна быть 4,2 %. Для того чтобы уточнить нормативы использования отечественных реактивов, нами были проведены специальные исследования.

Приводим способ приготовления декапсулирующего раствора, активность по хлору которого составляет 2,8 %.

Раствор готовится следующим образом. В 1 л воды растворить 30 г хлористого натрия, затем добавить такое количество гипохлорита кальция или натрия, чтобы количество активного хлора в нем составляло 28 г/л. Этот раствор проаэрировать в течение 10 мин и отстоять 12 ч. Жидкость, находящаяся над осадком, используется в качестве декапсулирующего раствора. В 1 л раствора можно продекапсулировать 80 г яиц.

Декапсулирование проводится так.

Яйца помещают в пресную воду на 1 ч, а затем в декапсулирующий раствор на 10–15 мин (но не более). Раствор все это время тщательно перемешивают.

После того как хорион растворится и раствор приобретет оранжевый цвет, яйца собирают в сачок и промывают в течение 10 мин в проточной воде (до полного исчезновения запаха хлора).

Для дезактивации остатков хлора сачок с эмбрионами следует несколько раз опустить в децимолярную соляную кислоту, после чего опять тщательно промыть.

Инкубация эмбрионов производится обычным способом: в растворе с соленостью 30%о при температуре 28° и сильном продувании воздухом. Инкубация длится 24–36 ч. При этом следует избегать яркого освещения, так как световой порог у декапсулированных эмбрионов значительно снижен.

Весь процесс декапсулирования должен протекать при pH выше 10 (для этой цели в декапсулирующий раствор вносят карбонат натрия).

В случае одновременной обработки значительной порции яиц температура раствора может повыситься. Поскольку при температуре выше 40° эмбрионы обработанных яиц погибают, надо следить, чтобы она не превысила этот уровень. Для понижений температуры можно использовать водяную баню с проточной холодной водой или льдом.

При обработке большого количества яиц начинают применять специальные установки (такая установка разработана в Бельгии).

В случае инкубации продекапсулированных эмбрионов эффект воздействия обработки следует оценивать не только по скорости освобождения эмбрионов от хориона, но и по проценту выклева науплиев из продекапсулированных яиц. Для контроля можно учитывать процент выклева необработанных яиц.

В наших экспериментах эффективность выклева науплиев из обработанных яиц не снижалась, а даже несколько увеличивалась. Декапсулирование проводилось раствором гипохлорита натрия с концентрацией активного хлора 2,8 %. При 10-минутной экспозиции увеличение выклева эмбрионов достигало 11 %, а при 15-минутной — 17 %. Такие же результаты получены при использовании гипохлорита кальция.