В первой серии опытов на 32 поросятах выясняли эффект татуировки в зависимости от частоты оборотов в минуту татуировочных инструментов.
Для татуировки были применены: хирургический дермоджектор (пневмотурбина), коммерческий инструмент для татуировки, электробритва, экспериментальные инструменты. Татуировка проводилась на глубину 1,5 миллиметров, продолжительность татуажа 10-20-60- секунд.
Животных наблюдали 1,2,4,7, дней после имплантации пигментов. По окончании опыта их умерщвляли инъекцией воздуха в сердце.
В результате наблюдений авторы пришли к заключению, что ожог и травма кожи были меньшими при меньшем калибре иглы и том же времени татуажа. Лучшим оказался инструмент с мотором от электробритвы. Чем большее число оборотов, тем больше повреждалась кожа при длительности татуажа в 60 секунд. Сопоставлены четыре срока татуажа – 10,20,30 и 60 секунд. Оказалось, что при 10 секундах пигмент распределяется неравномерно, при 20 и 30 секундах достигалось удовлетворительное распределение пигмента, но нарастало повреждение кожи – ожог и расщепление поверхностного слоя её. При 60 секундах отмечены серьёзные повреждения кожи – ожоги и повреждения захватывали всю толщу кожи, количество отложившегося пигмента было избыточным. Воспалительную реакцию кожи на сернокислую ртуть исследовали на 20 поросятах.
Указанный пигмент вводили в двух модификациях: измолотый стандартными жерновами и покрытый силиконом. Силикон использовали как дисперсионную среду. В дальнейшем животных умерщвляли спустя 1,2,4,8,15,21,28,35,42,82 дня после татуажа. В результате анализа полученных данных оказалось, что силиконовое покрытие сернокислой ртути, по-видимому, не уменьшает воспалительной реакции в коже.
Conway, Мс Kinnei, Clumобобщают двадцатилетний опыт закрашивания капиллярных гемангиом нерастворимыми пигментами. Общее число больных -1022 человека. Авторы считают, что успех лечения татуажем зависит от локализяции и вида гемангиом. Winer различает субэпидермальные, дермальные и субдермальные плоские гемангиомы
Благоприятные результаты получают с помощью татуажа при гемангиомах дермальных и субдермальных. При субэпидермальных гемангиомах татуаж оказывается неэффективным вследствие того, что поверхностно отложившийся пигмент со временем отходит вместе с эпидермисом. На основании последних наблюдений и своих ранних работ (1947, 1948, 1953 гг.) авторы считают, что для суждения об окончательных результатах достаточно 4-х недель после татуажа.
Клиническая оценка изменений после 1—2 сеансов татуажа может заменить биопсию для диагностики вида гемангиомы. При испытании нового прибора дермоджектора, который откладывает пигмент при более высокой скорости, в 16% были получены неудовлетворительные результаты. Наряду с участками хорошего закрашивания имелись плохо закрашенные зоны гемангиомы. Отмечалось и распределение пигмента полосками. У наблюдаемых за 20 лет больных при татуировке были отмечены следующие осложнения. В 14 случаях имело место воспаление подкожной клетчатки, воспаление быстро прошло после лечения антибиотиками. У 64 больных образовались небольшие участки пещеристых гемангиом диаметром до 4 мм, которые были иссечены. В 29 случаях пришлось прибегнуть к частичным иссечениям ввиду избыточного внесения пигмента. В 42 случаях потребовалось хирургическое иссечение всей гемангиомы из-за несхожести цвета красителя и нормальной кожи.
Следует указать на осложнения, описанные в литературе (Madden, 1938, 1949; Smith, 1950; Jaffe, 1960) такие, как инфекционный гепатит, волчанка, гнойничковые заболевания и другие, которые возникали при осуществлении татуажа с целью украшения. В этих случаях татуаж выполнялся не медицинскими работниками, нарушались правила асептики и антисептики
В работах зарубежных авторов того времени нет сведений о токсичности пигментов, об их влиянии на микроструктуру кожи, не проведены гистологические и гистохимические исследования.
Novy (1944), Thomson, Douglas указывают на токсичность сернокислой ртути и пытаются уменьшить её за счёт применения полимеров типа силикона.
В 1970 году нашей соотечественницей Кольцовой Л. А. была проведена большая научная работа по изучению влияния красителей на ткани организма кролика.
В ходе этой работы была получена важная информация на основании динамических гистохимических исследований по ряду показателей: РНК, ДНК, щелочных фосфатаз, сульфгидрильных групп.
Инертность пигментов в физическом и химическом отношении является обязательным условием. Такую инертность определяет ряд параметров: нерастворимость в обычных жидких тканевых средах, отсутствие химического взаимодействия с элементами тканей. Биологическая инертность означает отсутствие реакций клеточных элементов на этот аллопластический материал.
Клинические наблюдения уже давно дали основание считать, что применяемые пигменты обладают указанными качествами, однако тот методический уровень, на котором основывалось это утверждение, было недостаточным. Кольцова Л. А. сочла необходимым изучить и представить динамическую картину состояния клеточных элементов в очагах депо пигмента.
Исследования показали, что кажущаяся инертность на самом деле связана с определенными реакциями. Они выражаются в уменьшении содержания РНК на первые сутки после татуажа. На 3—5 сутки количество их выравнивается, спустя 7 суток – повышается, а после 10 – достигает нормы.
После татуажа положительная реакция на ДНК по сравнению с нормой не меняется. Однако уже в первые сутки после татуировки окраска ядер всего фона выражена бледнее, интенсивность окрашенности уменьшается до 7-го дня. Начиная с 10 дня, при той же локализации ДНК, интенсивность окраски ядер снова возрастает и к 20—25 дням не отличается от нормы. В итоге существенного влияния красителя на содержание ДНК в ядрах не отмечено.
Сульфгидрильные группы были исследованы Кольцовой Л. А. исходя из факта их влияния на активность ферментов, участвующих в различных этапах белкового, жирового и углеводного обмена, что само по себе говорит о большом влиянии этой функциональной группы на возникновение, интенсивность и направленность разнообразных физиологических процессов.
Сульфгидрильные группы оказывают большое влияние на активность многих гормонов, на обратимые явления белков, образующих тканевые структуры, участвуют в явлениях клеточной проницаемости, в процессах роста и деления клеток.
Результаты, полученные при выявлении сульфгидрильных групп позволяют судить об оживлении обменных процессов на 2—5 сутки после введения красителя в кожу, но, начиная с 7 суток и в более поздние сроки, содержание сульфгидрильных групп соответствует норме.
Биологическое значение щелочных фосфатаз состоит в образовании неорганического фосфата, необходимого для обеспечения процессов обмена веществ (Я. Г. Эренпрейс, 1963). Фосфатазную активность связывают с 3-мя группами функциональных проявлений клетки:
1.с быстрым обменом жидкости через клеточную поверхность
2.с процессом нормальной и патологической кальцификации,
3.с метаболизмом нуклеопротеидов.
По данным Кольцовой Л. А. отмечено некоторое увеличение содержания щелочной фосфатазы в клетках соединительной ткани на 3,4,5 сутки после татуажа, что позволяет предполагать активизацию обменных процессов в коже при введении красителя. Но уже к 15 дням после имплантации активность клеток на щелочную фосфатазу снижается и обменные процессы нормализуются.
Выявленные гистологические и гистохимические сдвиги оказалисьнезначительными, кратковременными, вслед за которыми наступала стабилизация с приближением к норме. В целом гистологические и гистохимические исследования, которые провела Кольцова Л. А., дают основания для заключения о возможности использования пигментов для татуажа.
Для определения токсичности красителей проводились опыты на 250 белых мышах. Кольцовой Л. А. исследовались 2 группы красителей: активные водорастворимые красители, образующие ковалентную связь с белком проционы и индифферентные соединения – пигменты. Однако оказалось, что при выявлении острой токсичности мыши погибали после трёхкратного введения «проционового красного 2Bs». Наличие кумулятивных свойств, установленное для проционов, рассматривается как противопоказание кприменению. Пигменты (двуокись титана, окись цинка, охры) при экспериментальном изучении оказались не токсичными, они не диффундируют в окружающие ткани, не окрашивают живую клетку.