В крови человека в разных ее составляющих находятся антигены, они получены каждым человеком по наследству от родителей. Это, примерно, как обязательное наличие носа, ушных раковин и тому подобных элементов строения. Но эти, в принципе похожие антигены по некоторым своим свойствам отличаются друг от друга у разных людей, различающиеся антигены одного типа называют изоантигенами, это как бы варианты строения одного и того объекта. Антигены одного типа, но несколько отличающиеся по свойствам составляют систему. В общей сложности в настоящее время науке известны многие десятки систем. Внутри системы существует деление на группы по факту наличия или отсутствия того или иного изоантигена. В разных системах выделяют разное количество групп. Например, по системе АВО людей принято делить на четыре основных группы. Мы называем в быту эти группы: первая группа крови, вторая, третья и четвертая группа. По другим системам людей можно разделить на другое количество групп, например, по системе MNSs - на девять групп.
Отдельно взятый человек по каждой из имеющихся систем обязательно относится к какой-либо группе. Например, по АВО - ко второй группе, по MNSs - к пятой, по системе Le - к третьей, и так далее.
Принято считать, что подавляющее количество групп разных систем проявляются у людей совершенно независимо друг от друга. То есть, если у человека по системе АВО вторая группа, то у него по другим системам может быть любая группа. С учетом этого положения, увеличение числа исследованных систем уменьшает частоту встречаемости набора групп крови. Исследовав кровь, например по десяти системам, можно получить свыше 300 тысяч комбинаций, таким образом одна конкретная комбинация групп может встретиться у одного из 300 тысяч человек. Естественно, приведенные цифры условны и для разных сочетаний систем и групп будут отличаться, однако они наглядно демонстрируют, как с увеличением количества исследуемых систем антигенов возрастают возможности дифференциации происхождения биологических объектов (в первую очередь крови) от разных индивидуумов.
Рассмотрим судебно-медицинские возможности исследования некоторых систем антигенов применительно к пятнам крови.
Группы крови эритроцитарных систем
В судебно-медицинской практике в целях установления групповой принадлежности крови наиболее часто проводят исследование нескольких эритроцитарных систем.
1. Система АВО. В ней выделяют четыре основные группы: первая (1) группа характеризуется наличием в эритроцитах антигена О, а в плазме крови антител альфа (и) и бета (Р); вторая (II) - наличием в эритроцитах антигена А, в плазме антитела бета; третья (III) - наличием в эритроцитах антигена В, в плазме антитела альфа; четвертая (IV) - наличием в эритроцитах антигенов А и В и отсутствием в плазме антител альфа и бета. Частота встречаемости этих групп примерно составляет: 1 - 35%; II - 35%; III - 20%; IV - 10%.
Кроме того, установлено, что в эритроцитах большинства людей со второй, третьей и четвертой группой содержится антиген Н, сходный по своим свойствам с антигеном О. Поэтому систему АВО называют еще АВО (Н). Обнаружена особенность антигена А у разных людей, этот антиген может проявляться в разного рода реакциях сильно и слабо. Обнаружение этих дополнительных особенностей значительно расширило возможности дифференцирования объектов по системе АВО.
Для отнесения крови к той или иной группе чаще производят обнаружение антигенов, а не антител, потому что антигены значительно более устойчивы к внешним воздействиям, что важно для объектов судебно-медицинской экспертизы. Известны случаи обнаружения антигенов системы АВО в тканях, хранившихся сотни и даже тысячи лет, например в литературе отмечается, что были установлены группы крови некоторых мумий египетских фараонов. Но проводятся исследования и на наличие антител альфа и бета.
Методы выявления антигенов системы АВО основаны на их способности абсорбировать антитела альфа и бета. Разработано несколько методик проведения таких исследований, наиболее применяемые: количественный метод абсорбции агглютининов: метод абсорбцииэлюции и метод смешанной агглютинации. Каждый из них имеет свои достоинства и недостатки, например количественный метод абсорбции агглютининов недостаточно чувствителен, но позволяет избежать влияния загрязнений, методы абсорбции-элюции и смешанной агглютинации при определенных неточностях в выполнении методики могут привести к экспертным ошибкам, но зато очень чувствительны и могут быть использованы при очень малом количестве исследуемого вещества.
Отмеченными выше недостатками не обладает реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Она позволяет точно определить видовую и групповую принадлежность даже отдельной клетки. Суть этой методики в том, что антитела, меченные различными флюорохромами, вступают в контакт с антигенами, расположенными на поверхности объектов исследования, например на внешней оболочке сперматозоида. После удаления не прореагировавших антител остаются только соединившиеся с антигенами. При микроскопическом изучении объектов исследования в ультрафиолетовом свете наблюдается свечение в тех местах, где расположены искомые антигены. Таким образом, определяется не только наличие антигенов, но и их расположение на объекте.
В результате исследования объекта (объектов) эксперт-биолог обнаруживает или не обнаруживает в нем те или иные антигены и антитела. Если характер объекта таков, что эксперт точно уверен в его происхождении от одного человека, то по выявленному набору антигенов и антител он точно устанавливает, что объект относится к такой-то группе системы АВО. Установив группу, специалист сравнивает ее с группой крови потерпевшего и подозреваемого. При несовпадении групп эксперт делает вывод, что кровь не произошла от данного конкретного лица. При совпадении - делается вывод, что кровь могла произойти от конкретного человека.
Если эксперт не может быть уверен, что объект исследования образован кровью только одного лица, то сделать конкретный вывод об исключении или не исключении происхождения пятна крови от конкретного лица он не может. Например, при обнаружении в пятне крови антигена В, при неисключении смешивания крови, эксперт сделает вывод, что пятно могло быть образовано или кровью третей группы или кровью третей группы в смеси с кровью первой. На основании такого результата в качестве источника крови в данном пятне будут исключены лица со второй и четвертой группой и не исключены лица с первой и третьей.
