Влияние ингаляционного введения аэрозоля эфирных масел на развитие сенсибилизации дыхательного тракта. Ингаляционное введение яичного белка предварительно сенсибилизированным морским свинкам сопровождалось развитием анафилактической реакции без гибели животных. Частота дыхания возрастала до 184 в 1 мин при нормальной частоте 124 в 1 мин.
У животных, сенсибилизированных яичным белком, которые одновременно с сенсибилизацией и в последующие два дня получали ингаляции монарды, базилика или лавра, не отмечалось признаков анафилактической реакции в ответ на ингаляционное введение разрешающей дозы антигена. Частота дыхания не изменялась.
Действие эфирного масла монарды на гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ). Эфирное масло монарды подавляет развитие ГЗТ по отношению к самым различным антигенам при использовании разнообразных схем сенсибилизации и в широком диапазоне доз — от 2 до 250 мг/кг. Высокие дозы подавляли формирование ГЗТ по отношению к стафилококковому антигену при любых схемах. Средние дозы (70 мг/кг) подавляли отторжение кожного аллотрансплантата, но при одновременном с трансплантацией введении. Низкие дозы (2 мг/кг) ингибировали развитие реакции ГЗТ только при предварительном введении. Эффекты ингибиции ГЗТ наблюдались в ответах на двух различных видах животных.
Действие растительных ароматических веществ на животных различных генетических линий. Для исследования возможной связи РАВ с генетическими особенностями животных нами были поставлены опыты на трех группах инбредных линий мышей — ДВА, СВА, C57BL6 по 32 животных в каждой и трех соответствующих контрольных группах по 8 животных. Каждая опытная группа была разделена на 4 подгруппы по 8 животных. Мыши этих подгрупп ежедневно по 40 мин (кроме субботы и воскресенья) находились в камерах, воздух которых содержал летучие компоненты масла лаванды в концентрации 20 мг/м.куб. Мышам первой подгруппы было проведено 5 процедур, второй — 10, третьей — 15, четвертой — 20 процедур. По окончании последней процедуры проводили исследования и животных забивали. В контрольной группе процедуры не проводили.
Рис. 7. Влияние РАВ на показатели липидного обмена животных, длительно содержащихся в гермообъемах с разным составом газовых сред.
1 — общий холестерин (ммоль/л); 2 — триглицериды (ммоль/л); 3 — альфа-липопротеиды (ммоль/л); 4 — бета-липопротеиды (ммоль/л); 5 — индекс атерогенности (ед.); а — ЕА; б — ИА; в — БИА.
Животных опытных и контрольных групп исследовали до начала эксперимента и на 5-й, 10-й, 15-й и 20-й день эксперимента. Определяли количество АОК, суммарное количество антител, иммуноглобулины, функциональное состояние Т-лимфоцитов, ставили реакцию ГЗТ.
Установлено, что у инбредных линий мышей динамика иммунного ответа под влиянием летучих фракций лаванды имела однонаправленный характер. По высоте иммунного ответа между разными линиями мышей регистрировались достоверные различия (рис. 7). Так, сравнение иммунных ответов мышей линии C57BL6 и СВА, мышей линии C57BL6 и DBA выявило достоверные различия (Р<0,001 и Р<0,01) между группами по количеству АОК, титру общих антител, ГЗТ, функциональной активности Т-клеток. Можно с уверенностью сделать заключение, что неоднотипность иммунного ответа разных групп инбредных линий мышей при действии на организм РАВ обусловлена их генетической детерминированной неоднородностью.
В другом эксперименте опыты поставлены на двух конгенных линиях мышей — BLOP 111 (20 животных) и BLOD2 (44 животных). Во время эксперимента, который длился 25 дней, мышей помещали ежедневно (кроме субботы и воскресенья) в атмосферу, содержащую РАВ лаванды в концентрации 20 мг/м.куб. Состояние иммунной системы оценивали на 7—15-й и 25-й день эксперимента по показателям первичного иммунного ответа, включающим определение АОК, IgM, реакцию ГЗТ и функциональную активность Т-лимфоцитов. Результаты исследований свидетельствуют, что у конгенных мышей линии BLOP111 и BLOD2 динамика показателей иммунного ответа в первые 25 дней опыта имела однонаправленный характер. Однако на 25-й день эксперимента было зарегистрировано достоверное различие между группами по количеству АОК. Можно предположить, что те различия, которые были выявлены в иммунном ответе двух конгенных линий мышей на действие РАВ, связаны с их неоднородностью по генам комплекса гистосовместимости Н-.
Фенотипическое действие РАВ на иммунную систему. Опыты поставлены на мышах линии СВА (высокореагирующих на эритроциты барана) и C57BL6 (низкореагирующих). Животные опытных групп ежедневно по 40 мин (кроме субботы и воскресенья) находились в камерах, воздух которых содержал летучие фракции монарды в концентрации 20 мг/м.куб. Проведено 8 процедур. Животные контрольных групп ингаляций не получали. Результаты исследований представлены в табл. 10. Приведенные данные свидетельствуют, что на 10-е сутки отмечается тенденция к нарастанию количества Т-лимфоцитов у мышей линии СВА.
Таблица 10. Клеточный иммунный ответ мышей линий СВА и C57BL6 на эритроциты барана на 10-е сутки ингаляции летучими фракциями монарды
Линия мышей
Группа
Число Т-РОК
Р*
СВА
Контроль (6)
Опыт (6)
13±5
17±3
0,05
C57BL6
Контроль (3)
Опыт (3)
7±2
26±1
0,05
* Р — достоверность между опытом и контролем.
Обнаруженные данные о стимулирующем воздействии монарды на Т-систему иммунитета удалось подтвердить в экспериментах на низкоотвечающей на эритроциты барана линии мышей C57BL6, т.е. летучие фракции эфирного масла монарды повышали иммунный ответ у низкореагирующих на эритроциты барана линии мышей до уровня, отмеченного у животных линии СВА, высокореагирующих на этот антиген.
Пролиферативная активность спленоцитов мышей C57BL6, оцененная на пике иммунного ответа на эритроциты барана (на 4-е сутки после иммунизации), оказалась достоверно выше таковой у мышей линии СВА (табл. 11).
Таблица 11. Пролиферативная активность спленоцитов мышей C57BL6 и СВА на пике иммунного ответа
Линия мышей
Группа
Индекс стимуляции (число импульсов в опыте/число импульсов в контроле)
СВА
Контроль (6)
Опыт (6)
31,8
C57BL6
Контроль (6)
Опыт (6)
9,2
Спленоциты мышей опытной группы линии C57BL6 включают 3Н-тимидин значительно активнее спленоцитов мышей опытной группы (обработанных на пике иммунного ответа монардой) линии СВА.
Учитывая литературные данные о генетической рестрикции силы иммунного ответа, реализуемой на уровне Т-клеток, можно говорить о способности некоторых РАВ (в частности, монарды) к фенотипической коррекции клеточного компонента иммунного ответа.
Экспериментально установленный факт возможности фенотипической коррекции компонента иммунного ответа имеет существенное практическое значение, поскольку решение этого вопроса может способствовать повышению эффективности лечения.
Влияние РАВ на функцию гипофизадреналовой системы, гуморальный и клеточный ответ. Изучена взаимосвязь между нейроэндокринными сдвигами в организме экспериментальных животных, подвергнутых действию РАВ, и иммунным ответом. Использованы мыши-самки гибридов Fl (CBAXC57BL6) и СВА. Животные ежедневно по 40 мин (кроме субботы и воскресенья) в течение 10, 20 и 30 дней находились в камере, воздух которой содержал летучие компоненты различных РАВ в концентрации 20 мг/м.куб.
Исследовали гуморальный иммунный ответ на эритроциты барана в реакции Ерне. Во второй части работы исследовали клеточный иммунный ответ по способности клеток лимфатических узлов мышей СВА инактивировать эндогенные стволовые клетки в сублетально облученном организме гибридов Fl (CBAXC57BL6) [Петров Р.В. и др., 1970]. Иммунизацию осуществляли в дозе 2 -Ю8 в боковую вену хвоста в объеме 0,5 мл среды 199. Иммунный ответ оценивали на 5-е сутки после иммунизации по числу антителообразующих клеток в селезенке в дозе 2-106 степени спленоцитов. Оценку клеточного иммунного ответа проводили на 8-е сутки после внутривенного введения клеток лимфатических узлов по числу колоний на селезенке.